携带NDV HN基因的减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统构建及其生物学特性分析

作者：宋敏杰; 周小双; 石胜丽; 朱文文; 田文静; 程相朝; 郁川^*

来源：河南农业科学, 2021, 50(10): 116-123.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2021.10.015

• 新城疫病毒
• HN基因
• Ⅲ型分泌系统
• 减毒沙门菌
• 生物学特性

为构建能稳定携带新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶蛋白(Hemagglutinin-neuraminidase protein,HN)基因的减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统,从pMD18-T-HN中扩增出NDV HN基因,并将其克隆入载体pYA3493-sopENt100,构建重组载体pYA3493-sopENt100-HN,然后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门菌?crp?asd SL1344,并对其重组菌的生长特性、遗传稳定性、表达特性和毒力特性等进行分析。结果显示,携带NDV HN基因的重组减毒鼠伤寒沙门菌?crp?asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN)构建成功;重组菌?crp?asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN)的生长趋势与互补菌?crp?asd SL1344(pYA3493-sopENt100)和缺失菌?crp?asd SL1344相似,与亲本菌株SL1344有明显差异;重组菌能够稳定表达HN基因;减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统能够有效递呈HN基因,并诱导其在鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)内表达;重组菌的LD50与互补菌和缺失菌没有明显差异,与亲本菌株SL1344差异较大。以上结果表明,成功构建了携带NDV HN基因的新型减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统?crp?asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN),能够有效递呈NDV HN基因并使其高效表达,且安全性高,遗传稳定。

• 单位
  动物科技学院; 河南科技大学; 洛阳职业技术学院