白藜芦醇通过调节SIRT1改善环磷酰胺诱导的人颗粒细胞氧化应激损伤

作者：吴海峰; 贾建雷; 李倩; 甄秀丽; 魏雅楠; 乜照燕^*

来源：河北医科大学学报, 2022, 43(07): 832-838.

• 白藜芦醇
• 环磷酰胺
• 体外受精

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol, RES)对4-过氧化氢环磷酰胺(4-hydroperoxy cyclophosphamide, 4-HC)诱导人颗粒细胞(granulosa cells, GCs)氧化应激损伤改善作用。方法 收集体外受精-胚胎移植患者卵泡液GCs进行体外培养。苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色对GCs鉴定，Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测4-HC诱导GCs毒性和RES对4-HC诱导GCs毒性改善作用。将GCs分为3组：对照组、4-HC组、RES+4-HC组。CCK-8测定GCs存活率，活性氧荧光探针DCFH-DA检测GCs内活性氧(reactive oxygen species, ROS),水溶性四氮唑1测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD),钼酸铵法检测过氧化氢酶(catalase, CAT),Western Blot测定沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 1,SIRT1)蛋白表达。结果 4-HC(0,1.0,2.5,5.0,7.5μmol/L)处理GCs, CCK-8结果显示随4-HC浓度增加，GCs存活率降低，与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05),选择2.5μmol/L 4-HC为后续4-HC模型浓度。RES(0、5、10、25、50、75μmol/L)处理GCs 2 h后加入2.5μmol/L 4-HC,结果显示，RES可提高GCs存活率，与4-HC组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。选择50μmol/L RES为后续改善浓度。对3组GCs处理后各项检测结果显示，与CON组比较，4-HC组GCs存活率、SOD、CAT降低，ROS增加(P<0.05)。与4-HC组比较，RES+4-HC组GCs细胞活率、SOD、CAT增加，ROS降低。Western Blot显示RES+4-HC组SIRT1升高，与其他2组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RES可能通过增加SIRT1表达改善4-HC诱导GCs损伤。

• 单位
  河北省胸科医院; 河北医科大学第四医院