高效液相色谱法测定人红细胞中6-甲基巯基嘌呤核糖核苷酸的浓度

作者：师少军; 吴健鸿; 刘亚妮; 陈华庭; 曾繁典

来源：中国医院药学杂志, 2011, (09): 719-722.

• 6-甲基巯基嘌呤核糖核苷酸
• 6-甲基巯嘌呤
• 高效液相色谱法 6-methylmercaptopurine ribonucleotides
• 6-methylmercaptopurine
• HPLC

目的:建立测定人红细胞6-甲基巯基嘌呤核糖核苷酸(6-MMPR)浓度的高效液相色谱法。方法:红细胞首先经70%高氯酸沉淀蛋白,并在酸性条件下100℃加热45min,6-MMPR水解生成6-甲基巯嘌呤(6-MMP)后进样分析。以6-MMP定量分析6-MMPR浓度。色谱柱为Hypersil GOLD C18柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长290nm,柱温35℃;流动相为0.02mol.L-1磷酸钾缓冲液(pH3.3)-乙腈(95∶5);流速0.9mL.min-1。结果:红细胞中6-MMP在80.91~3 236.36pmol.(8×108)-1红细胞浓度范围内线性关系良好(r2=0.998 5),最低定量浓度为80.91pmol.(8×108)-1红细胞。日内及日间RSD分别小于2.09%,5.61%,方法回收率为100.27%~110.79%,平均提取回收率大于70%。结论:该法操作简便快速、灵敏、专属性强,可应用于患者服用硫唑嘌呤后红细胞6-MMPR浓度的测定。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院