抗PD-1抗体促进细胞因子诱导的杀伤细胞的体外趋化

作者：马彦; 王瑶; 冯超杰; 马静; 高耀; 赵玲娣; 李铁鹏^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(03): 503-506.

• 抗程序性死亡受体-1抗体
• 细胞因子诱导的杀伤
• 趋化
• 趋化因子

目的探讨抗程序性死亡受体-1(PD-1)抗体联合细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞抗肿瘤作用的可能机制, 及此过程中CXC趋化因子受体3(CXCR3)-CXC趋化因子配体9/10/11(CXCL9/10/11)信号轴的作用。方法取肾细胞癌(RCC)患者外周血10 ml, 密度梯度离心获取外周血单个核细胞(PBMC), 利用重组纤维连接蛋白(5 μg/ml)、抗CD3抗体(5 μg/ml)、干扰素-γ(IFN-γ, 1 000 U/ml)及白细胞介素-2(500 U/ml)制备CIK细胞。流式细胞技术检测CIK细胞表型, CIK细胞及PBMC中T淋巴细胞CXCR3的表达。利用消化酶混合液消化肾癌组织制备RCC单细胞悬液, 分为两组, 一组加入抗PD-1抗体(抗PD-1组), 另一组加入非特异性IgG设为对照组。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测CXCL9/10/11及IFN-γ mRNA表达水平, Transwell实验检测CIK细胞迁移能力。两组间比较采用t检验, 相关分析采用线性回归。结果 CIK细胞中CD3+CD4+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞占比分别为(32.93±11.77)%、(59.67±11.60)%, 表达CXCR3的CD3+T细胞百分比(28.05±4.15)%显著高于PBMC (6.69±5.29)%, t=6.354, P<0.01。抗PD-1组CXCL9/10/11及IFN-γ的mRNA相对表达水平(1.29±0.41, 1.87±0.72, 1.58±0.68, 1.24±0.39)均显著高于对照组(t=2.655, 4.511, 3.175, 2.315, P<0.05), 且趋化因子CXCL10/11与IFN-γ的mRNA相对表达水平呈正相关(F=6.672, 9.227, P<0.05)。抗PD-1组CIK细胞的迁移率[(16.64±6.47)%]显著高于对照组[(14.21±6.26)%, t=4.075, P<0.01]。结论 RCC中, 抗PD-I抗体可能通过CXCR3-CXCL9/10/11信号轴促进CIK细胞的趋化迁移, 进而发挥协同抗肿瘤作用。

• 单位
  郑州大学; 河南省肿瘤医院