耐热β-甘露聚糖酶的异源表达及低聚寡糖制备研究

作者：者园园; 苗华彪; 吴倩; 慕跃林; 黄遵锡^*

来源：饲料研究, 2021, 44(23): 63-68.

DOI：10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.014

• β-甘露聚糖酶
• 枯草芽孢杆菌
• 克隆表达
• 酶学性质
• 甘露寡糖

研究从魔芋基地筛选产甘露聚糖酶菌株,并克隆甘露聚糖酶基因。设计兼并引物获得目的基因,通过电转化法至毕赤酵母GS115中实现异源表达,研究该重组酶的酶学特性。结果显示,重组甘露聚糖酶DL4man基因为1 104 bp,蛋白分子量为41.5 kDa,糖苷水解酶26家族。最适反应pH值为5.5,最适反应温度为55℃,70℃下半衰期为70 min,80℃下耐受100 min后剩余46%的酶活,属于耐高温甘露聚糖酶,具有良好的胃-胰蛋白酶耐受性。酶解角豆胶的产物主要是聚合度为2、3、4、5的甘露寡糖。酶解魔芋粉的主要产物是聚合度为2、3的甘露寡糖。研究实现耐高温甘露聚糖酶在毕赤酵母GS115中的异源表达。研究表明,该酶酶解魔芋粉、角豆胶均能够生成甘露低聚糖,可为甘露低糖的制备提供参考。

• 单位
  生命科学学院; 云南师范大学