Klf10沉默抑制机械力诱导的人牙周膜细胞成骨向分化

作者：余小琴; 李云龙; 高锦瑜; 刘华

来源：上海口腔医学, 2017, 26(06): 599-604.

DOI：10.19439/j.sjos.2017.06.006

• 口腔正畸
• Klf10
• 人牙周膜细胞
• 机械力
• 成骨分化

目的 :探讨Klf10沉默对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)受力后骨向分化的影响。方法:分离培养HPDLCs,RNA干扰沉默Klf10的表达,用离心加力法对细胞加载机械力,并予hedgehog信号通路特异性激动剂purmorphamine进行干预。采用ELISA法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,采用RT-PCR和Western印迹法分别检测各组细胞Klf10 m RNA和蛋白表达水平,并检测成骨标志基因Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和骨钙素(osteocalcin,OCN)m RNA和蛋白的表达情况;利用Western免疫印迹法检测hedgehog信号转导通路成员胶质瘤相关癌基因同源物1(glioma-associated oncogene homolog 1,GLI1)和Ptch1(patched-1)的蛋白表达。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果 :机械力诱导6 h后,Klf10、Runx2、OPN和OCN m RNA和蛋白的表达显著升高,ALP活性升高,GLI1和Ptch1蛋白表达升高(P<0.05)。与空白组相比,转染Klf10 si RNA组Klf10 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.05)。同时,Klf10 si RNA显著抑制ALP活性,下调Runx2、OPN和OCN m RNA和蛋白的表达,抑制GLI1和Ptch1蛋白表达(P<0.05)。Purmorphamine显著抑制Klf10 si RNA沉默介导的成骨分化效应(P<0.05)。结论 :Klf10沉默可以抑制机械力作用下HPDLCs的骨向分化,可能与调节hedgehog信号转导通路有关。

• 单位
  延安大学附属医院; 安康市人民医院