基于NF-κB信号通路探讨氯化镧抑制高磷致血管平滑肌细胞钙化的机制

作者：谷超; 赵璐璐; 李刚; 高原; 王胜男; 李晓佳; 元晓荣; 王琪雯; 包勒朝鲁; 韩瑞兰^*

来源：中国药房, 2021, 32(20): 2458-2466.

• 氯化镧
• 高磷
• 血管钙化
• 核因子κB信号通路
• 人血管平滑肌细胞

目的:探讨氯化镧对高磷致血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的抑制作用及其机制。方法:在MTT法筛选氯化镧作用浓度及时间的基础上,将人VSMCs分为对照组(1 mmol/L磷溶液)、氯化镧高浓度对照组(1 mmol/L磷溶液+60μmol/L氯化镧)、模型组(3 mmol/L磷溶液)、氯化钠组(3 mmol/L磷溶液+180μmol/L氯化钠)、核因子κB(NF-κB)信号通路激动剂+氯化镧组(3 mmol/L磷溶液+1μg/mL脂多糖+60μmol/L氯化镧)、阳性对照组(3 mmol/L磷溶液+100μmol/L焦磷酸钠)和氯化镧低、中、高浓度组(3mmol/L磷溶液+15、30、60μmol/L氯化镧),采用茜素红S染色法和Von Kossa染色法检测经磷溶液作用6 d、相应药物作用2 d后各组细胞的钙化情况,采用Western blot法检测细胞中肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、NF-κB p65、骨形态发生蛋白2(BMP-2)、平滑肌22α(SM22α)、Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白的表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中TRAF6、IκBα、BMP-2、SM22α、Runx2 mRNA的表达水平。结果:与对照组比较,氯化镧高浓度对照组细胞没有出现钙化,模型组和氯化钠组细胞均出现明显钙化且光密度(OD)值均显著升高(P<0.01),细胞质中TRAF6、BMP-2蛋白及其mRNA的表达水平和Runx2 m RNA的表达水平以及细胞核中NF-κB p65、Runx2蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01),细胞质中IκBα、SM22α蛋白及其mRNA的表达水平和NF-κB p65蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,氯化镧各浓度组和阳性对照组细胞的钙化均明显改善,OD值均显著降低,上述蛋白及mRNA的表达水平均不同程度逆转(P<0.05或P<0.01)。与氯化镧高浓度组比较,NF-κB信号通路激动剂+氯化镧组细胞出现明显钙化,OD值显著升高,细胞质以及细胞核中上述指标均显著逆转(P<0.05或P<0.01)。结论:氯化镧可抑制高磷诱导的VSMCs钙化,其机制可能与抑制NF-κB信号通路活化有关。

• 单位
  内蒙古医科大学