基于mTOR信号通路探讨鹿茸多肽对大鼠退变椎间盘髓核细胞自噬的影响

作者：姚啸生; 马南廷; 戚晓楠; 崔海舰; 杨鸫祥

来源：中华中医药学刊, 2023, 41(07): 21-25.

DOI：10.13193/j.issn.1673-7717.2023.07.004

• 鹿茸多肽
• 髓核细胞
• 自噬
• 椎间盘退变

目的 探讨鹿茸多肽(pilose antler polypeptides, PAP)对大鼠退变椎间盘髓核细胞自噬的影响。方法 购入1月龄的60只健康SD大鼠，随机分为正常组(normal)、对照组(control)、鹿茸多肽组(PAP)、雷帕霉素组(Rapamycin, Rap)、鹿茸多肽+雷帕霉素组(PAP+Rap)5组，每组12只。后4组采用双前肢去势直立法复制大鼠腰椎间盘退变模型。造模6周后，正常组普通饲养不做任何处置，对照组用0.9%氯化钠注射液灌胃，鹿茸多肽组用4.5 mg/mL浓度的鹿茸多肽灌胃，雷帕霉素组腹腔注射0.2 mg/mL浓度的雷帕霉素，鹿茸多肽+雷帕霉素组腹腔注射0.2 mg/mL浓度的雷帕霉素联合4.5 mg/mL浓度的鹿茸多肽灌胃，各组均给药8周。给药结束后，5组中，半数样本取L5-L6椎间盘及上下相邻椎体，用10%的甲醛溶液固定后使用苏木精-伊红染色和阿利新蓝染色进行切片染色，置于显微镜下观察；另半数样本取完整L5-L6椎间盘组织，经液氮罐速冻后移入-80℃冰箱冻存，Western blot检验Akt-mTOR信号通路相关蛋白p-mTOR、p-Akt和自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达。结果 Alcian blue染色及苏木精-伊红染色下，与对照组比较，PAP组、Rap组、PAP+Rap组均可显著延缓椎间盘退变。蛋白质印迹法检测p-Akt、p-mTOR的表达水平排列为：PAP+Rap>PAP>control>Rap(P<0.05);LC3-Ⅱ的表达水平排列为：Rap>PAP+Rap>control>PAP(P<0.05);LC3-Ⅱ/Ⅰ的比例排列为：Rap>PAP+Rap>control>PAP(P<0.05)。结论 鹿茸多肽具有抑制大鼠椎间盘髓核细胞自噬的作用，进而延缓大鼠椎间盘退变，这可能与激活mTOR信号通路有关。

• 单位
  辽宁中医药大学; 辽宁中医药大学附属医院