含RGD肽类弹性蛋白制备及促HUVECs细胞黏附的影响

作者：崔梅英; 王明月; 陈丽; 王冬梅; 杨泽斌; 黄莉莉; 刘宇轩; 关新刚^*

来源：北华大学学报(自然科学版), 2020, 21(06): 740-743.

• 类弹性蛋白多肽
• RGD肽
• 蛋白纯化
• 细胞黏附

目的探讨含RGD肽的类弹性蛋白多肽RGD-ELPs和RDG-ELPs与细胞相容性及两种融合蛋白对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)黏附的影响.方法应用大肠杆菌系统表达RGDELPs和RDG-ELPs蛋白,利用可逆相变循环(ITC)纯化两种融合蛋白;通过MTT法及活/死细胞染色法检测两种融合蛋白与人胚肾细胞(HEK293T)的相容性;通过贴壁细胞计数方法检测不同浓度RGD-ELP对体外HUVECs细胞黏附表达的影响.结果利用BL21(DE3)大肠杆菌表达系统制备高浓度的RGD-ELPs和RDGELPs,通过ITC纯化得到了高纯度融合蛋白; MTT法及活/死细胞染色法结果提示RGD-ELPs和RDG-ELPs蛋白具有良好的相容性;细胞黏附实验结果表明:RGD-ELPs浓度越大,HUVEC细胞黏附能力越强,而对照组RDGELPs则未显示出明显的细胞黏附效果.结论成功表达并纯化了RGD-ELPs和RDG-ELPs融合蛋白;两种蛋白均具有良好的细胞相容性; RGD-ELPs蛋白具有明显的促进HUVECs细胞黏附作用.

• 单位
  北华大学