摘要

目的建立同时测定人血中5种脂溶性维生素的高效液相色谱法。方法取血清0.5mL,甲醇蛋白沉淀后用正己烷、乙醚分2次提取,提取液氮气吹干,用甲醇-氯仿(3:1)液定容进样。色谱柱:Hypersil ODS(4.0 mm×250 mm);流动相:0-4.0min 甲醇-水(90:10),4.5-9 min甲醇-异丙醇(95:5),10-20 min甲醇-异丙醇(60:40);检测波长:维生素A 325 nm,25-羟基维生素 D3和维生素D3 265 nm,维生素E 290 nm,β-胡萝卜素450 nm;流速:1.0 mL·min-1;柱温:30℃。结果维生素A和β-胡萝卜素在0.1-1.2 mg·L-1,25-羟基维生素D3在10.0-120.0 μg·L-1,维生素D3在20-240μg·L-1,维生素E在2.0-24.0 mg·L-1内线性良好;提取回收率均大于69%,方法回收率均大于92%,日内、日间RSD均小于6%;以本法测定了50例体检儿童血清中5 种脂溶性维生素的浓度。结论本方法快速、灵敏,操作简便易行。

  • 单位
    浙江大学医学院附属儿童医院

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