匹格列酮对视网膜Müller细胞活化的影响

作者：顾宏卫; 张少华; 张俊芳; 秦柏; 胡楠

来源：南通大学学报(医学版), 2018, 38(03): 187-192.

DOI：10.16424/j.cnki.cn32-1807/r.2018.03.008

• 过氧化物酶体增殖物激活受体γ
• 吡格列酮
• Müller细胞
• 视网膜神经节细胞
• 细胞凋亡

目的 :探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)激动剂匹格列酮(pioglitazone,Pio)对Müller细胞活化及炎症因子分泌的影响。方法:第2代原代培养的大鼠Müller细胞鉴定后分为6组,对照组:不加任何药物;脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组:加入1μg/m L LPS;Pio组(共3组):分别加入0.1、1.0、10.0μmol/L Pio处理后再加入1μg/m L LPS;拮抗剂组:加入1.0μmol/L Pio及1μmol/L GW9662(PPARγ拮抗剂)处理后再加入1μg/m L LPS。将各组Müller细胞分别与视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)(RGC-5细胞株)共培养,流式细胞术检测RGC-5细胞的凋亡情况;免疫荧光及Western Blot测定Müller细胞中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及核因子(nuclear factorκB,NF-κB)P65的表达变化;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中炎症因子的分泌。结果 :(1)LPS刺激后Müller细胞中GFAP表达较对照组明显上升(P<0.05),Pio组GFAP的表达较LPS组均有下降(P<0.05)。(2)Pio组PPARγ蛋白表达较LPS组明显增加(P<0.05),拮抗剂组PPARγ蛋白表达较Pio组显著降低(P<0.05)。(3)Pio组NF-κB P65的表达较LPS组明显下降(P<0.05),而拮抗剂组较Pio组明显上升(P<0.05)。(4)Pio组肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)的水平较LPS组明显下降(P<0.05)。拮抗剂组TNF-α、IL-6较Pio组有明显上升(P<0.05)。(5)不同处理组的Müller细胞与RGC-5细胞共培养,Pio组RGC-5细胞凋亡较LPS组明显降低(P>0.05),拮抗剂组较Pio组明显上升(P>0.05)。结论 :PPARγ激动剂Pio能抑制Müller细胞的激活、抑制NF-κB信号通路及炎症因子释放,从而保护视网膜神经元。

• 单位
  南通大学附属医院