牛病毒性腹泻病毒 E~(rns)_(84-170aa)蛋白的可溶性表达及抗体间接ELISA检测方法的建立

作者：王建华; 宋哲; 刘洋; 唐赟; 李丹丹; 黄晨; 王乃福; 肖妍; 陈本龙

来源：中国兽医科学, 2020, 1-8.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0166

• 牛病毒性腹泻病毒
• E~(rns)
• 可溶性表达
• 间接ELISA
• 抗体检测 Bovine viral diarrhea virus
• E~(rns) protein
• soluble expression
• indect ELISA
• antibody detection

为建立一种检测牛病毒性腹泻病毒（BVDV）抗体的ELISA 方法，对E~(rns)蛋白一个包含2个预测抗原表位的96氨基酸蛋白编码序列，经密码子优化后进行基因合成，构建重组表达载体 pET-E~(rns)_(84-170aa)，转化表达菌株 BL21（DE3），在28 ℃用 0.1 mmol/L IPTG 诱导重组蛋白表达。将重组E~(rns)_(84-170aa)蛋白通过 Ni~(+)-NTA 树脂亲和层析方法纯化后，用Western-blot分析其抗原性。结果显示，重组E~(rns)_(84-170aa)蛋白以完全可溶形式在大肠杆菌中高效表达，经Ni~(2+)-NTA树脂纯化获得重组E~(...

• 单位
  西华师范大学; 生命科学学院