摘要

目的观察TGF-β1受体(TGF-β1 receptor, TβR)对成骨细胞中ClC-3氯通道表达的影响,初步探索TβR在ClC-3氯通道调控细胞成骨分化中的作用。方法通过CCK-8试剂盒法和Real-Time PCR法检测TβR抑制剂在MC3T3-E1细胞中对TβRⅠ、TβRⅡ表达的最佳抑制方式;观察阻断TβR对ClC-3氯通道表达的影响,以及通过siRNA基因转染技术阻断ClC-3氯通道观察对TβRⅠ、TβRⅡ表达的影响;并观察TβR对成骨相关基因(Alp、Runx2)表达的影响。结果浓度为2μmol/L的TβR抑制剂作用MC3T3-E1细胞24 h对TβRⅠ、TβRⅡ表达抑制作用较好,并且对细胞的毒性作用较小。抑制TβR表达可促进ClC-3基因和蛋白的表达(P<0.05),同样下调ClC-3氯通道的表达,TβRⅠ和TβRⅡ基因的表达升高(P<0.05),TβRⅡ升高程度强于TβRⅠ。阻断TβR可促进成Alp、Runx2的表达(P<0.05)。结论 TβR可抑制骨代谢过程中ClC-3氯通道在成骨细胞中的表达,TβRⅡ对ClC-3氯通道的表达更敏感。