抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及B细胞抗原表位的鉴定

作者：赵世华; 戚亭; 郭巍; 田志革; 朱超; 相文华

来源：中国兽医科学, 2013, (10): 1035-1039.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2013.10.010

• 马动脉炎病毒
• 单克隆抗体
• 肽扫描
• 表位 equine arteritis virus(EAV)
• MAb
• pepscan
• epitope

为鉴定马动脉炎病毒(EAV)N蛋白的抗原表位,利用原核表达系统表达N蛋白,用其免疫6周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合获得杂交瘤细胞,通过以重组N蛋白为包被抗原的间接ELISA方法筛选出2株能稳定分泌抗N蛋白的单克隆抗体(MAb),分别将其命名为2B3和2B9,其重链属于IgG1,轻链属于κ链。Western-blot证明,2株MAbs均能识别重组N蛋白。间接免疫荧光(IFA)试验证明,2株MAbs均与EAV呈阳性反应。用肽扫描法将N基因截短为具有相互部分重叠的11段,表达带HIS标签的重组蛋白,与MAb 2B3和MAb 2B9进行Western-blot和ELISA...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 生命科学学院