小鼠肝脏黏膜相关恒定T细胞在2型糖尿病发病中的作用研究

作者：葛康; 汤文娟; 沈蕾; 王洪东; 冯文焕; 朱大龙; 毕艳^*

来源：中华糖尿病杂志, 2021, 13(07): 720-725.

DOI：10.3760/cma.j.cn115791-20210111-00015

• 糖尿病, 2型
• 黏膜相关恒定T细胞
• 肝脏胰岛素抵抗

目的探讨小鼠肝脏黏膜相关恒定T(MAIT)细胞在2型糖尿病(T2DM)发病中的作用。方法将5周龄雄性C57BL/6小鼠分为模型组与正常对照组, 每组各5只, 模型组给予高脂饮食16周建立T2DM小鼠模型。利用密度梯度离心分离肝脏单个核细胞, 流式细胞仪检测肝脏MAIT细胞比例及干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素17(IL-17)及IL-4表达水平。分选T2DM小鼠肝脏MAIT细胞与正常小鼠原代肝细胞, 共培养后检测肝细胞糖代谢关键酶基因[葡萄糖-6-磷酸酶(G6pc)、丙酮酸激酶M1/2(Pkm)、6-磷酸果糖激酶1(Pfk1)] mRNA的相对表达量。组间比较采用独立样本t检验。结果与正常对照组相比, T2DM小鼠体重显著增加[分别为(49.87±0.99)和(26.41±0.81)g, t=36.76, P<0.05], 空腹血糖显著升高[分别为(11.52±0.46)和(6.12±0.48)mmol/L, t=16.22, P<0.05];肝脏脂肪变明显;流式细胞仪检测结果显示肝脏MAIT细胞比例显著升高[分别为(1.06±0.46)% 和(0.42±0.20)%, t=2.85, P<0.05], IFN-γ表达显著升高[分别为(27.18±13.14)% 和(47.56±13.08)%, t=2.46, P<0.05]。体外共培养实验表明, 与正常对照组比较, T2DM小鼠肝脏MAIT细胞正常小鼠原代肝细胞中G6pc表达量升高(t=14.60, P<0.01), Pkm(t=22.27, P<0.01)及Pfk1(t=4.28, P<0.05)表达量降低。结论肝脏MAIT细胞在T2DM中比例升高、IFN-γ表达增加, 可能通过促进肝糖输出驱动T2DM发生。

• 单位
  上海交通大学; 南京大学医学院附属鼓楼医院; 上海免疫学研究所