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摘要
目的分析精氨酸酶(ARG)在细粒棘球蚴感染小鼠肝白细胞中的表达和功能。方法将18只雌性BALB/c小鼠随机分为感染组和对照组,每组9只。感染组小鼠腹腔注射细粒棘球蚴原头节2 000个/鼠,对照组注射等量生理盐水。感染后270 d,分离小鼠肝组织中白细胞。蛋白质印迹(Western blotting)分析肝白细胞中ARG和一氧化氮合酶(NOS)的表达情况,采用Image J软件分析蛋白质表达丰度。ARG活性检测试剂盒、尿素检测试剂盒和一氧化氮(NO)检测试剂盒检测肝中白细胞的ARG活性、肝组织的尿素和NO含量。流式细胞术分析肝多种髓系细胞中ARG-1和T细胞中CD3ζ的表达情况。采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析。结果 Western blotting检测结果显示,感染组小鼠肝白细胞中ARG-1表达的灰度值为1. 03±0. 01,高于对照组的0. 12±0. 01(P <0.01);感染组小鼠肝白细胞中ARG-2和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)表达的灰度值分别为0.54±0.01和0.64±0.02,对照组分别为0.55±0.02和0.59±0.02,差异均无统计学意义(P> 0.05)。感染组小鼠肝白细胞中的ARG活性、肝组织中的尿素和NO含量分别为(0.03±0.00) U/ml、(0.66±0.02) mmol/L和(14.63±1.55)μmol/L,对照组分别为(0.02±0.00) U/ml、(0.04±0.01) mmol/L和(29.22±0.36)μmol/L,两组差异均有统计学意义(P <0.05)。流式细胞术分析发现,ARG-1在感染组小鼠肝白细胞中CD11b+CD11c+、 CD11b+F4/80+、 CD11b+Gr-1+、CD11b+Gr-1+Ly-6C-Ly-6G+、 CD11b+Gr-1+Ly-6C+-Ly-6G-和CD11b+Ly-6G+中表达的相对平均荧光密度分别为1.41±0.12、1. 21±0. 06、 1. 52±0. 16、 1. 30±0. 03、 1. 58±0. 12和1. 21±0. 04,均高于对照组的1. 00±0. 14、 1. 00±0. 05、1. 00±0.01、 1.00±0.07、 1.00±0.03和1.00±0.02 (P <0.05)。CD3ζ在感染组小鼠肝CD4+和CD8+T细胞中表达的相对平均荧光密度分别为0.82±0.04和0.78±0.05,均低于对照组的1.00±0.05和1.00±0.07 (P <0.05)。结论细粒棘球蚴感染小鼠肝白细胞中ARG-1表达增多,一定程度上拮抗NOS;肝CD4+和CD8+T细胞中CD3ζ表达下调。
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单位中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所; 科技部国家级热带病国际联合研究中心; 卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室
