重组抗人表皮生长因子受体2单克隆抗体的电荷异质体分析

作者：王海旗; 王斌; 李永东; 孙洪秀; 王朋辉; 毕利利^*

来源：国际生物制品学杂志, 2020, 43(05).

• 抗体, 单克隆
• 抗体亲和力
• 动力学
• 电荷异质体

目的探讨重组抗人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2, Her2)单克隆抗体(单抗)的酸碱电荷异质体对其生物活性和亲和力的影响。方法分别用过氧化氢、肽-N-糖苷酶F、羧肽酶B对抗Her2单抗进行氧化、脱糖、酶切处理。用阳离子交换高效液相色谱法和毛细管等电聚焦电泳分析抗Her2单抗的电荷异质体, 使用微量差示扫描荧光法分析抗Her2单抗的热稳定性, 用细胞增殖抑制法和表面等离激元共振技术分析抗Her2单抗的亲和力。结果脱糖处理抗Her2单抗的酸性电荷异质体增加了5.58%, 与免疫球蛋白G Fc受体1(high affinity immunoglobulin gamma Fc receptor Ⅰ, FcGR1A)的亲和力明显减弱, 亲和力常数为9.032×10-8 mol/L。氧化和酶切处理抗Her2单抗的热稳定性降低, 去折叠温度分别为63.6和59.5 ℃, 均低于未处理抗Her2单抗(66.7 ℃)。结论 3种处理均会使抗Her2单抗产生电荷异质性, 脱糖处理抗Her2单抗与FcGR1A的亲和力减弱, 氧化和酶切处理抗Her2单抗的热稳定性降低。

• 单位
  华兰基因工程有限公司