缺氧、缺氧/复氧对心肌细胞内ROS、MAPKs活性表达的影响

作者：凌学斌; 王军; 綦苗苗; 李继科; 郭峻莉; 李天发^*

来源：海南医学院学报, 2021, 27(07): 481-487.

DOI：10.13210/j.cnki.jhmu.20200914.003

• 缺氧/复氧
• 活性氧
• 丝裂原活化蛋白激酶
• 氯化钴
• 心肌细胞

目的:研究缺氧、缺氧/复氧条件对大鼠心肌细胞(H9c2)活性氧(ROS)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs活性及对细胞凋亡的影响。方法:使用化学性低氧模型诱导剂氯化钴(CoCl2)处理H9c2心肌细胞建立缺氧、缺氧/复氧模型。在不同浓度CoCl2(150、300、450、600、900、1 200、2 400μmol/L)以及不同时间(4、12、16、24、48h)下处理H9c2心肌细胞,采用MTT检测其活力;采用双氯荧光素(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)、二氢乙啶荧光探针(dihydroethidium,DHE)检测ROS水平;Western blot检测磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinases,MAPKs)(p-p38、p-ERK1/2和p-JNK)及Caspase-3活性水平。结果:使用300～1 200μmol/L CoCl2处理H9c2心肌细胞后,细胞存活率呈时间及浓度依赖性降低(P<0.01);与对照组相比,4、16 h后缺氧组ROS表达均升高(P<0.05),p-JNK、p-p38及Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),p-ERK表达无明显变化。缺氧/复氧组与缺氧组相比,ROS、p-p38,p-ERK1/2、p-JNK及Caspase-3活性表达更高(P<0.01)。结论:复氧可进一步加重缺氧引起的H9c2心肌细胞氧化应激损伤,活化ROS/MAPKs通路,证实心肌细胞缺血再灌注损伤在心脏缺血发病机制中有着重要的作用。

• 单位
  海南医学院; 第一附属医院心血管内科