牦牛SIRT3基因的克隆及其在各组织和睾丸不同发育阶段的表达

作者：王斌; 佟连鑫; 秦文昌; 李键; 殷实^*

来源：畜牧兽医学报, 2019, 50(12): 2431-2439.

• 组蛋白去乙酰化
• SIRT3
• 牦牛
• 组织表达谱
• 睾丸

旨在克隆牦牛沉默蛋白调节因子3(sirtuin 3,SIRT3)基因,并检测其在牦牛不同组织及不同年龄睾丸中的表达水平,从而为研究SIRT3在牦牛睾丸发育过程中的作用机制提供试验依据。本研究选取胎牛期(5～6个月)、幼年期(1～2岁)、性成熟期(3～5岁)及老年期(7～9岁)健康雄性牦牛共12头(每组各3头),其中来源于同一年龄阶段的3个组织样本视为生物学重复。采集性成熟期牦牛肝、心、肺、脾、脑、肾、肌肉、小肠、睾丸和大肠以及4个时期的睾丸组织。分别提取各组织的总RNA,并利用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术克隆获得牦牛SIRT3基因序列,使用相关生物信息学软件预测其编码蛋白质的结构和功能;通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测SIRT3 mRNA在牦牛各组织及睾丸4个发育阶段的表达水平。结果表明,SIRT3基因的ORF(open reading frame,开放阅读框)为1 002 bp,编码333个氨基酸,与黄牛和绵羊的同源性分别达到99.9%和96.7%,该基因的mRNA在牦牛的各个组织中广泛表达,在脾、睾丸、肺和肌肉中的表达量较高。随年龄增长SIRT3 mRNA在牦牛睾丸中表达呈现先上升后下降的趋势,其中在性成熟期的表达量最高。本研究为揭示SIRT3在牦牛生长发育,尤其是睾丸发育过程中的调控提供了一定的基础数据。

• 单位
  西南民族大学