摘要
目的研究通络类中药虎杖、半枝莲、蝉蜕及其药对和小复方的提取物对肺炎支原体(MP)的体外抑菌作用以及对MP感染A549细胞分泌炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子kappa B(NF-κB)的影响。方法将虎杖、半枝莲、蝉蜕分别用水提法和醇提法提取,液体培养法培养MP菌液,微量稀释法测定最小抑菌浓度;MTT法检测虎杖、半枝莲、蝉蜕、虎杖+半枝莲、虎杖+蝉蜕、半枝莲+蝉蜕、小复方提取物对A549细胞的毒性作用,并计算半数抑制浓度(IC50);挑选抑菌效果较好的组,实验分为正常组,模型组,虎杖醇提低、中、高浓度组,半枝莲醇提低、中、高浓度组,虎杖+半枝莲低、中、高浓度组,小复方低、中、高浓度组,MTT法检测各组培养12 h、24 h、36 h、48 h的MP感染A549细胞活力,ELISA法检测各组MP感染A549细胞分泌IL-6、TNF-α、NF-κB的水平。结果虎杖、半枝莲、蝉蜕的水提物和醇提物均有一定的体外抑制MP生长的作用,小复方醇提物最佳,药对醇提物优于药对水提物;单味药醇提物优于单味药水提物,蝉蜕水提物和醇提物最差;单味药、药对和小复方醇提物对细胞毒性的IC50值均大于水提物。模型组在MP感染A549细胞12 h、24 h、36 h、48 h后细胞活力均明显低于正常组(P均<0.05),各药物组(除虎杖醇提低剂量组外)干预48 h细胞活力均明显高于模型组(P均<0.05);模型组TNF-α、IL-6、NF-κB水平均明显高于正常组(P均<0.05),各药物组TNF-α、IL-6、NF-κB水平均明显低于模型组(P均<0.05),且呈量效关系。结论虎杖、半枝莲、蝉蜕及其药对和小复方均具有一定体外抑制MP的作用,且醇提物的效果优于水提物,小复方的效果优于单味药和药对,推测中药的抑菌作用与中药提取方法和药物的相互配伍产生的协同作用有关;中药提取物对于MP感染后的A549细胞具有保护作用,且对MP引起的炎症反应有调节作用。
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单位上海中医药大学附属龙华医院