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摘要
目的:研究冬凌草甲素(Ori)体内外抗卵巢癌(OC)活性及相关机制。方法:采用网络药理学方法分析Ori抗OC的核心靶点，并通过GO和KEGG富集分析筛选其相关生物学过程和通路。通过分子对接验证Ori与核心靶点的结合活性。用不同浓度(0、5、10、15、20、25、30μmol/L)Ori干预SKOV3细胞24和48 h,采用CCK-8法检测细胞存活率。将SKOV3细胞分为3组：对照组、8μmol/L Ori组、16μmol/L Ori组，给予相应药物干预24 h后，采用EdU染色和克隆形成实验检测细胞增殖能力，Annexin V-PE/7-AAD染色后流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot检测凋亡相关蛋白(Cleaved-Caspase-3、Bax、Bcl-2)和PI3K/AKT通路相关蛋白(p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT)的表达。加入PI3K激活剂740Y-P后，将细胞分为3组：对照组、16μmol/L Ori组、Ori+740Y-P组，给予相应药物干预24 h后，采用Western blot检测上述凋亡相关蛋白和PI3K/AKT通路相关蛋白的表达，CCK-8法检测细胞存活率。构建OC裸鼠荷瘤模型，将裸鼠分为3组：对照组、15 mg/kg Ori组、30 mg/kg Ori组，每组5只，给予相应药物治疗3周。给药结束后，测量肿瘤体积，采用免疫组化检测瘤组织中Ki-67的表达，HE染色观察主要器官的病理变化。结果:网络药理学研究显示，Ori抗OC的核心靶点是TP53、AKT1、ALB、EGFR、ESR1等，KEGG富集分析显示共有145条通路显著富集，包括癌症通路、PI3K/AKT通路等。分子对接显示大部分核心靶点与Ori有较强的结合活性。细胞实验结果表明，与对照组相比，8和16μmol/L Ori组的EdU阳性细胞率和克隆形成率均降低，细胞凋亡率增加，Cleaved-Caspase-3和Bax表达增加，Bcl-2表达、p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT均降低(P<0.05)。与16μmol/L Ori组相比，Ori+740Y-P组的p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和Bcl-2表达增加，细胞存活率升高，Cleaved-Caspase-3和Bax表达降低(P<0.05)。动物实验结果表明，与对照组相比，15和30 mg/kg Ori组肿瘤体积缩小，Ki-67表达降低(P<0.05),且裸鼠的肝、肾、心、肺未见明显病理改变。结论:Ori在体内外均表现出抗OC活性，其机制可能与抑制PI3K/AKT通路进而抑制细胞增殖并诱导凋亡有关，且体内用药安全，可能是一种潜在的抗OC药物。
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