H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆与表达

作者：王金萍; 宋建领; 张文东; 李作生; 冯子良; 胡媛媛; 郭松辉; 张应国; 范泉水; 宋学林; 邱薇; 张富强

来源：云南大学学报(自然科学版), 2007, (06): 623-627.

• 禽流感病毒
• H5N1亚型
• 血凝素
• 表达 avian influenza virus
• H5N1 subtype
• hemagglutinin
• expression

根据已知H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因序列设计、合成克隆引物.自灭活的云南地方H5N1亚型病毒阳性临床组织样品中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶(PyobestTMDNA Poly-merase)扩增HA基因,采用Invitrogen定向表达系统(ChampionTMpET directional TOPO expression system)进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组HA,分子质量约78 ku.采用阳性血清经免疫印迹及ELISA分析重组HA的免疫反应性,结果表明重组HA能与H5N1亚型病毒抗血清发生特异性结合,具有良好的免疫反应性.

• 单位
  云南省动物疫病预防控制中心; 成都军区疾病预防控制中心军事医学研究所