一个新的人类睾丸特异性基因-TDRG1的cDNA克隆

作者：蒋先镇; 阳建福; 汤育新; 谭小军; 李辉; 张向阳; 吴畏

来源：中国男科学杂志, 2006, (07): 3-8.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0848.2006.07.002

• 基因克隆
• 数据库消减杂交
• 逆转录聚合酶反应
• 睾丸
• 组织特异表达

目的克隆一个新的人睾丸特异性基因。方法运用“数据库消减杂交”(Digital Differential Display,DDD)方法筛选人类睾丸特异表达新基囚,获得有差异显示的代表新基因的克隆重叠群,挑选其中一个克隆重替群Hs．180197进行多组织RT-PCR验证该重叠群在人睾丸中的表达。然后从包含该重叠群的IMAGE克隆出发,采用生物信息学的方法克隆一个人类新基因的全长cDNA序列。结果新基因全长1197bp,开放阅读框为504～806bp,定位于6p21．1-p21．2,编码由100个氨基酸组成,分子量为10KD,等电点为6．81的一个蛋白,该蛋白与已知蛋白无同源性。克隆实验验证该基因阅读框完全正确,推测其可能与精子生成相关,暂命名为TDRGI(Testis Development Related Gene 1),GenBank登录号为DQ168992。结论“数据库消减杂交”与实验验证相结合用于发现更多人类功能新基因是行之有效的。

• 单位
  中南大学湘雅医院; 中南大学; 中南大学湘雅三医院