肝癌细胞中热休克蛋白27相互作用蛋白的分离和鉴定

作者：孙雪峰; 何松

来源：重庆医科大学学报, 2010, (08): 1221-1223.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.2010.08.035

• 热休克蛋白27
• 肝癌
• 免疫共沉淀
• 液相色谱-电喷雾离子阱质谱
• 蛋白质印迹 HSP27
• Hepatocellular carcinoma
• Co-immunoprecipitation
• LC-ESI-ITMS/MS
• Western blot

目的:筛选肝癌中热休克蛋白27(Heat shock protein,HSP27)相互作用蛋白。方法:采用免疫共沉淀技术富集肝癌HepG2.2215细胞的HSP27结合蛋白,直接酶解后进行液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱分析(LC-ESI-ITMS/MS),通过相应的肽序列标签(Peptide sequence tags,PST)在SWISS PROT数据库中搜索蛋白质。并用免疫共沉淀和蛋白质印迹分析技术对所鉴定的HSP27相互作用蛋白之一HSP90进行了验证。结果:通过搜索数据库在肝癌细胞系中首次鉴定了12个HSP27结合蛋白,分别是HSP90、HSP70、特异性下调葡萄糖调节蛋白78(GRP...

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院