腺病毒介导hIGF-1基因转染对软骨细胞增殖的影响

作者：黄宗强; 刘尚礼; 郑召民; 黄建荣; 沈慧勇; 黄东生

来源：中国临床解剖学杂志, 2005, 23(1): 9-13.

DOI：10.3969/j.issn.1001-165X.2005.01.003

• 软骨细胞
• 胰岛素样生长因子
• 腺病毒

目的:探讨腺病毒介导人胰岛素样生长因子(humaninsulin-like growthfactor,hIGF-1)基因转染对软骨细胞增殖的影响.方法:构建携带hIGF-1基因的重组腺病毒并进行PCR、Western blot鉴定.体外培养人胚胎软骨细胞,用处于对数增长期的第3代软骨细胞进行实验.分别转染1、10、100及500不同感染复数单位(multiplicity of infection,MOI)的Ad/hIGF-1,用PBS做阴性对照,hIGF-1生长因子(100μg/L)做阳性对照,采用四氮甲基唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同时间、不同组别软骨细胞吸光度.结果:第2代重组腺病毒上清液中PCR鉴定含有hIGF-1基因,Western blot证实Ad/hIGF-1表达成熟的hIGF-1生长因子.不同病毒滴度转染对软骨细胞增殖的影响存在量效依赖关系,100 MOI软骨细胞吸光度约为对照组3倍,1 MOI与10 MOI、500 MOI对软骨细胞增殖的影响近似;PBS组随着细胞体外培养时间延长,细胞增殖下降,hIGF-1生长因子、hIGF-1基因对软骨细胞增殖的影响存在时效关系,72 h达到峰值.结论:Ad/hIGF-1基因转染对软骨细胞增殖的影响存在量效、时效依赖关系.

• 单位
  中山大学; 郑州大学第一附属医院