齐帕特罗残留检测酶联免疫吸附试验方法的建立及优化

作者：郭东光; 邱骏峰; 张凯波; 陈明艳; 卞爽丽; 李文明; 崔龙威; 孙国鹏; 李鹏; 朱艳平; 岳锋; 王选年^*

来源：动物医学进展, 2023, 44(12): 46-53.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2023.12.015

• 齐帕特罗
• 瘦肉精
• 间接竞争ELISA
• 免疫学快速检测

为建立检测齐帕特罗(ZIL)残留物的间接竞争酶联免疫吸附试验(ic-ELISA),以获得的抗ZIL兔多抗血清为基础，以制备的完全抗原为包被源，通过优化反应条件，建立了检测ZIL残留物的ic-ELISA检测方法。结果表明，兔血清最佳稀释比例为1∶6 000,抗原最佳包被浓度为2μg/mL,半数抑制浓度(IC50)为0.317 ng/mL,线性检测范围(IC20～IC80)为0.136～1.181 ng/mL,最低检测限(LOD,IC10)为0.081 ng/mL。经优化后，检测体系最佳pH为7.4,盐浓度≤0.4 mol/L,甲醇、乙醇、丙酮和和DMSO的含量≤5%,乙腈含量≤10%,且检测基质中牛尿液浓度≤15%时能够获得较高的检测灵敏度，并且该检测方法具有良好的稳定性和特异性，批内和批间重复试验样品添加回收率分别为101%～112%和101%～120%,变异系数均低于10%,检测结果与HPLC-MS检测结果的相关系数为R2=0.990 6。该检测方法检测速度快、灵敏度强、准确性高、重复性好、检出限低，适用于ZIL残留的高通量检测和现场快速筛查。

• 单位
  生物工程学院; 新乡学院