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摘要
目的 :建立TIE2-R849W突变斑马鱼模型并初步探讨其在静脉畸形中可能的致病机制。方法 :通过合成TIE2-R849W突变基因表达体系,利用成熟的mRNA显微注射技术,基于fli1a:EGFP转基因斑马鱼构建TIE2-R849W过表达斑马鱼模型,荧光显微镜下记录斑马鱼尾静脉丛(caudal vein plexus,CVP)的早期发育改变并定量比较。提取斑马鱼RNA,针对目标基因行实时定量PCR(qRT-PCR),利用已有基因芯片进一步验证结论。采用GraphPad Prism 5.0进行统计学分析。结果:基于对TIE2-R849W过表达斑马鱼模型的观察,TIE2-R849W显著影响斑马鱼早期尾静脉丛的发育,表现为尾静脉丛窦腔数量和面积显著减少。qRT-PCR显示,TIE2-R894W可引发pik3r2、foxo1b的表达上调,而与尾静脉丛发育相关的基因,除显著高表达的egfl7外,nr2f2、nr2f1a和s1pr1均无显著异常表达。比较体外芯片结果,部分突变组内的tie2、pik3r2、foxo1b及egfl7同样存在一致的高表达。结论:TIE2-R849W引发斑马鱼尾静脉丛发育异常与egfl7的高表达关系密切。
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