活血消瘿方含药血清对脂多糖诱导的甲状腺滤泡上皮细胞炎性损伤、凋亡及JAK2/STAT3通路的影响

作者：裴迅^*; 左新河; 赵勇; 李扬; 付畅

来源：中医药导报, 2022, 28(06): 14-19.

DOI：10.13862/j.cn43-1446/r.2022.06.004

• 结节性甲状腺肿
• 活血消瘿方
• 脂多糖
• 甲状腺滤泡上皮细胞
• 炎性损伤
• 凋亡
• JAK2/STAT3通路

目的:探讨活血消瘿方含药血清对脂多糖(LPS)诱导的甲状腺滤泡上皮细胞(TFECs)炎性损伤、凋亡及Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路的影响。方法:体外培养无菌分离的大鼠TFECs,使用LPS诱导构建TFECs损伤模型。制备活血消瘿方含药血清和对照血清。分别用0(对照血清)、0.5%、1%、2.5%、5%、10%、20%、40%、80%活血消瘿方含药血清和LPS处理TFECs,MTT法检测吸光度值并计算其增殖抑制率和半数抑制浓度(IC50)。TFECs随机分为对照组、模型组、低浓度活血消瘿方含药血清组、中浓度活血消瘿方含药血清组、高浓度活血消瘿方含药血清组及优甲乐含药血清组,并给予相应干预。实验结束后,收集细胞,观察各组TFECs形态;ELISA法检测TNF-α、IL-6水平;流式细胞仪分析细胞凋亡率;Western blotting检测胶质标记蛋白Tg、增殖凋亡相关蛋白(Caspase-3、Caspase-8、Bax、Bcl-2)及JAK2/STAT3通路相关蛋白表达水平。结果:不同浓度活血消瘿方含药血清处理后细胞增殖抑制率均明显升高(P<0.05),具有浓度依赖性。活血消瘿方含药血清对LPS诱导的TFECs细胞增殖抑制率的IC50是20%。与对照组比较,模型组TFECs变大、排列松散、胶质减少、折射不清晰,Tg、Bcl-2和p53蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),凋亡率、TNF-α水平、IL-6水平、Caspase-3蛋白表达、Caspase-8蛋白表达、Bax蛋白表达及JAK2、STAT3磷酸化水平均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,低、中、高浓度活血消瘿方含药血清组和优甲乐含药血清组TFECs排列逐渐紧密、胶质逐渐增多,Tg、Bcl-2和p53蛋白表达均明显升高(P<0.05),凋亡率、TNF-α水平、IL-6水平、Caspase-3蛋白表达、Caspase-8蛋白表达、Bax蛋白表达及JAK2、STAT3磷酸化水平均明显降低(P<0.05),且各浓度活血消瘿方含药血清组不同指标水平呈现剂量依赖性。结论:活血消瘿方含药血清可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路,减轻LPS诱导的TFECs炎性损伤,并抑制细胞凋亡。

• 单位
  湖北省中医药研究院; 湖北省中医院