Vipr2敲除对小鼠视网膜功能的影响

作者：赵福新; 汪琪; 王莉; 阳凡; 郑阳洋; 赵晨琛; 朱禾; 周翔天; 瞿佳^*

来源：中华眼视光学与视觉科学杂志, 2022, 24(07): 485-493.

• Vipr2
• Vipr2敲除
• 多巴胺
• 高效液相色谱法
• 视网膜电生理

目的: 检测血管活性肠肽受体2(Vipr2)敲除小鼠多巴胺(DA)等神经递质含量和视网膜电生理, 明确Vipr2敲除对视网膜功能的影响。方法: 实验研究。利用RT-PCR检测血管活性肠肽(Vip)、Vipr2在4周龄雄性C57BL/6J小鼠眼球组织中的表达水平。通过CRISPR-Cas9基因编辑技术构建Vipr2敲除(Vipr2-KO)小鼠, 然后在4周龄时检测Vipr2-KO和Vipr2野生型(Vipr2-WT)小鼠视网膜中DA等神经递质含量及视网膜电生理功能。Vipr2-KO小鼠与Vipr2-WT小鼠DA等神经递质含量比较采用独立样本t检验, 而2种小鼠视网膜电生理数据比较采用双因素重复测量方差分析。结果: Vip和Vipr2 mRNA在小鼠视网膜、脉络膜+视网膜色素细胞、角膜和巩膜中均有表达;在虹膜和晶状体中Vipr2呈低表达, 未检测到Vip表达。与Vipr2-WT小鼠相比, Vipr2-KO小鼠表现为近视(t=2.51, P=0.017), 视网膜DA、3, 4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)含量均明显升高(t=3.42, P=0.001;t=2.15, P=0.037;t=3.27, P=0.002), DOPAC/DA比值无变化;而玻璃体液中DA、DOPAC、DOPAC/DA、HVA、去甲肾上腺素含量差异均无统计学意义。视网膜和玻璃体液中天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、牛磺酸和γ氨基丁酸含量在Vipr2-KO小鼠与Vipr2-WT小鼠之间差异均无统计学意义。在暗适应不同光刺激强度下(-3.699、-2.201、-0.699、0.301、0.799 log cd·s/m2), Vipr2-KO小鼠相比Vipr2-WT小鼠, b波振幅明显增加(F=8.65, P=0.015)。结论: Vipr2敲除可引起4周龄小鼠屈光向近视发展, 影响视网膜中DA、DOPAC、HVA合成代谢, 并引起视网膜电生理功能异常。提示Vipr2敲除可能通过影响视网膜功能参与近视形成, 但具体作用机制有待进一步研究。

• 单位
  温州医科大学附属眼视光医院