天马颗粒通过FLI-1/Klotho通路对结肠癌细胞HCT116增殖抑制的作用机制研究

作者：王华帅; 谢彪; 罗敏; 何永恒^*

来源：湖南中医药大学学报, 2022, 42(10): 1656-1662.

DOI：10.3969/j.issn.1674-070X.2022.10.011

• 天马颗粒
• FLI-1/Klotho通路
• 结肠癌
• 细胞增殖
• 质粒转染
• 中药血清
• 机制研究

目的 研究天马颗粒通过FLI-1/Klotho途径对结肠癌细胞（HCT116）增殖抑制的作用机制。方法 将HCT116细胞分为blank组、shRNA组、shTMKL组、TMKL组。blank组为空白对照，shRNA组为HCT116细胞瞬时转染FLI-1 shRNA,shTMKL组为shRNA组基础上加入天马颗粒血清干预，TMKL组为天马颗粒血清干预HCT116细胞。各组细胞培育24 h后，进行后续实验检测。q PCR检测各组细胞FLI-1 mRNA和Klotho mRNA表达；Western blot法检测各组细胞FLI-1蛋白和Klotho蛋白相对表达；流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡，并计算S期细胞比值（S-phase fraction, SPF);CCK-8法检测各组细胞增殖。结果 与blank组相比，shRNA组、shTMKL组FLI-1、Klotho蛋白及mRNA表达量降低（P<0.05）,TMKL组FLI-1、Klotho蛋白及mRNA表达量升高（P<0.05）；与shRNA组相比，shTMKL组FLI-1、Klotho蛋白及mRNA表达量差异无统计学意义（P>0.05）,TMKL组FLI-1、Klotho蛋白及m RNA表达量升高（P<0.05）；与shTMKL组相比，TMKL组FLI-1、Klotho蛋白及mRNA表达量升高（P<0.05）。与blank组相比，shRNA组HCT116细胞增殖能力增强（P<0.05）、SPF值升高（P<0.05）、凋亡率下降（P<0.05）,shTMKL组、TMKL组HCT116细胞增殖能力受到抑制（P<0.05）、SPF值降低（P<0.05）、凋亡率升高（P<0.05）；与shRNA组相比，shTMKL组、TMKL组HCT116细胞增殖能力受到抑制（P<0.05）、SPF值降低（P<0.05）、凋亡率升高（P<0.05）；与shTMKL组相比，TMKL组HCT116细胞增殖能力受到抑制（P<0.05）、SPF值降低（P<0.05）、凋亡率升高（P<0.05）。结论 天马颗粒可通过FLI-1基因调控Klotho蛋白表达，进而抑制HCT116细胞增殖、诱导凋亡。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南省中医药研究院附属医院; 湖南中医药大学第二附属医院