基于网络药理学探究虎杖苷通过SIRT1/HMGB1对炎性巨噬细胞RAW264.7极化的调控机制

作者：刘柯; 周云鑫; 丁军颖^*

来源：免疫学杂志, 2023, 39(05): 369-378.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20230048

• 虎杖苷
• 细菌性肺炎
• 巨噬细胞极化
• 网络药理学
• SIRT1/HMGB1/NF-κB信号通路

目的 基于网络药理学和体外实验，验证巨噬细胞RAW264.7的极化调变规律，探究虎杖苷（PD）防治细菌性肺炎的可能作用机制。方法 利用PharmMapper、SwissTargetPrediction、SEA和TCMSP数据库预测药物靶点，在GeneCards和DiseNET数据库里获取细菌性肺炎靶点，采用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析，以STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络，再以体外实验予以验证。将细胞分为3组：以LPS刺激的为模型对照组（Model, M），同时予以虎杖苷干预的为PD实验组（PD），另设空白对照组（Control, C）。以CCK8法检测不同浓度虎杖苷对细胞活力的影响；以ELISA法检测细胞上清SIRT1/HMGB1信号通路终末效应分子NF-κB、IL-1β及巨噬细胞极化因子MCP-1、Arg1的分泌水平；以qPCR法检测细胞沉淀SIRT1/HMGB1信号通路相关分子SIRT1、HMGB1、TLR4及TRAF6的mRNA表达。结果 网络药理学分析共得到61个虎杖苷与细菌性肺炎的交集靶点，结合GO和KEGG富集分析及蛋白质相互作用网络构建结果，确定了SIRT1、HMGB1、TLR4、TRAF6、NF-κB为后续实验靶点。体外实验进一步证实，PD组NF-κB、IL-1β及MCP-1分泌水平较M组显著降低，Arg1则明显升高；PD组SIRT1的mRNA表达较M组显著上调，但HMGB1、TLR4及TRAF6的m RNA表达显著下调。结论 虎杖苷可通过SIRT1/HMGB1调控TLR4、NF-κB等信号通路分子及极化因子MCP-1、Arg1的表达，调变巨噬细胞极化，可能是治疗细菌性肺炎的潜在药物。

• 单位
  首都医科大学; 北京中医医院