嵌合型PCV1-3感染性克隆的构建及病毒拯救

作者：李佳昕; 田瑶; 韩先杰; 杨莹; 王硕; 时建立; 李琛; 刘畅; 彭喆; 吴晓燕; 韩红; 李俊^*

来源：家畜生态学报, 2023, 44(10): 77-96.

• 嵌合型病毒
• 感染性克隆
• PCV1
• PCV3

为了构建猪圆环病毒1型(porcine circovirus type 1, PCV1)和猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3, PCV3)的嵌合病毒PCV1-3,并为PCV3疫苗研制奠定基础，该研究以PCV1基因组为骨架，将PCV1的ORF2基因替换为PCV3的ORF2基因，构建嵌合型猪圆环病毒(PCV1-3)DNA克隆。PCR和序列测序结果显示，成功构建出了PCV1-3感染性克隆；将感染性克隆转染PK-15细胞，并将第4代病毒进行免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和蛋白免疫印迹(Western Blot)检测，结果显示成功拯救了重组病毒PCV1-3。对第4代病毒进行滴度测定，效价为105.13TCID50/mL。因此，该试验成功拯救出一种新型嵌合型病毒PCV1-3,并为进一步研究PCV3疫苗奠定了基础。

• 单位
  青岛农业大学; 山东省农业科学院; 山东师范大学