Smac/DIABLO增强子宫内膜癌细胞对紫杉醇化疗敏感性的机制研究

作者：王晓华; 韩冰; 张玉娟^*

来源：现代肿瘤医学, 2019, 27(18): 3194-3198.

DOI：10.3969/j.issn.1672-4992.2019.18.007

• 子宫内膜癌
• Smac/DIABLO
• 过表达
• 紫杉醇
• 化疗敏感性

目的:研究上调Smac/DIABLO基因在人子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达,对紫杉醇化疗增敏方面的作用及可能机制。方法:构建Smac/DIABLO的过表达质粒pcDNA3.1-Smac,应用脂质体法转染人子宫内膜癌Ishikawa细胞,实验分为过表达组、空载体对照组和空白对照组。转染48 h后,应用qRT-PCR和Western blot法检测Smac/DIABLO mRNA及蛋白表达情况。将转染pcDNA3.1-Smac的Ishikawa细胞暴露于终浓度为0.1μmol/L紫杉醇中,实验分为pcDNA3.1-Smac+紫杉醇组、紫杉醇组和空白对照组,CCK-8法检测暴露紫杉醇24,48,72,96h,3组细胞增殖能力的变化。应用Western blot检测Ishikawa细胞过表达Smac/DIABLO并暴露于紫杉醇后,Caspase-3,Caspase-7,Caspase-9蛋白的表达情况。结果:转染48 h后,过表达组较空载体对照组、空白对照组,Smac/DIABLO mRNA及蛋白相对表达量均明显增加(F=152.056,P=0.002;F=697.953,P=0.001)。CCK-8实验结果显示,过表达Smac/DIABLO并暴露于紫杉醇后,pcDNA3.1-Smac+紫杉醇组较紫杉醇组和空白对照组,细胞增殖能力受到抑制(P<0.05)。Western blot检测到pcDNA3.1-Smac+紫杉醇组Caspase-3,Caspase-7,Caspase-9蛋白的相对表达量比较另外两组明显增加(FCaspase-3=434.277,FCaspase-7=392.401,FCaspase-9=88.936,P<0.05)。结论:上调Smac/DIABLO表达可增强Ishikawa细胞对紫杉醇的化疗敏感性,其机制可能通过线粒体和死亡受体两条途径,解除凋亡抑制蛋白家族对Caspase的抑制作用。

• 单位
  承德医学院附属医院