醒神通督针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的作用研究

作者:兰瑞; 邹旭欢; 马云枝; 付雪琴; 王漫漫; 王玮玮; 张勇*
来源:中国中医基础医学杂志, 2023, 1-13.
DOI:10.19945/j.cnki.issn.1006-3250.20230704.001

摘要

目的 从自噬探讨醒神通督针刺抗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组(简称模型组)和脑缺血再灌注+醒神通督针刺组(简称针刺组)。采用大脑中动脉线栓法构建脑缺血再灌注损伤模型,针刺组大鼠造模前5d开始干预,取穴“百会”“四神聪”“足三里”,每日针刺1次,直至再灌注24h。另外2组大鼠只抓取不针刺。再灌注24h后采用氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazoliumchloride,TTC)染色观察脑梗死面积,透射电镜观察神经元及自噬的亚显微结构,Westernblot、免疫荧光检测缺血皮层微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associatedproteinlightchain3B,LC3)、肌球蛋白样BCL2结合蛋白(coiledcoilmoesinlikeBCL2interactingprotein,Beclin-1)、自噬相关蛋白12(autophagyrelatedprotein12,Atg12)、蛋白激酶B(proteinkinaseB,Akt)与磷酸化Akt(phosphorylatedAkt,p-Akt)的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠大脑中动脉供血区梗死面积明显增加(P<0.05),且缺血皮层神经元结构严重破坏,自噬明显激活,自噬蛋白Beclin-1、Atg12表达及LC3Ⅱ/I比值显著升高(P<0.05),p-Akt表达下降(P<0.05)。与模型组比较,针刺组大鼠脑梗死面积减少(P<0.05),透射电镜显示神经元结构较为正常,自噬体较少。此外,针刺组自噬蛋白Beclin-1、Atg12表达及LC3Ⅱ/I比值明显降低(P<0.05),p-Akt表达显著上调(P<0.05)。结论 针刺具有抗脑缺血再灌注损伤作用,可能通过抑制自噬的活化实现。

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