RNA干扰作用于HIV-1vpr基因的筛选实验研究

作者：张权; 周泉; 何艳; 龚国忠; 郑煜煌; 周华英; 黄娜

来源：中国全科医学, 2015, 18(14): 1671-1674.

• RNA干扰
• HIV-1
• HIV-1vpr基因
• HEK293T细胞

目的筛选鉴定针对Hl V-1vpr基因的小干扰RNA(siRNA)片段。方法根据siRNA设计要求合成siRNA56、siRNA160和siRNA185寡核苷酸片段,分别转染至含HIV-1vpr质粒的HEK 293T细胞,并进行总RNA提取,采用Real-time PCR和Western blotting分别从核酸和蛋白水平对HIV-1vpr基因表达水平进行验证。结果siRNAs成功转染含HIV-1vpr质粒的HEK 293T细胞,降低了HIV-1vpr基因的表达水平,其中在RNA水平siRNA160组干扰抑制作用最强,抑制率为89%;在蛋白水平siRNA56组干扰抑制作用最强,抑制率为96%。结论 3个基因片段的siRNA均可以下调HIV-1vpr的表达水平,但存在差异性,为探索HIV/AIDS基因治疗的可行性和高效性提供了可靠的实验依据。

• 单位
  中南大学湘雅二医院