摘要
目的 研究石菖蒲有效成分β-细辛醚对氧糖剥夺/复糖复氧损伤星形胶质细胞的保护作用及机制。方法 将星形胶质细胞分为5组:对照组、模型组、β-细辛醚(50μg/mL)组、5μmol/L核因子-E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)组、50μg/mLβ-细辛醚+5μmol/LML385组。CCK-8检测细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡水平,以DCFH-DA法检测细胞内ROS水平,试剂盒检测细胞氧化应激因子[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)]及炎症因子[核因子-κB亚基p65(NF-κBp65)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18]的水平,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测Nrf2、血红素氧化酶1(HO-1)mRNA的表达水平,免疫印迹法检测Nrf2、醌氧化还原酶1(NQO1)、HO-1蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组、ML385组及β-细辛醚+ML385组细胞凋亡率、LDH、ROS、MDA、NF-κB P56、IL-1β和IL-18水平明显升高,细胞存活率、Nrf2、NQO-1、HO-1、SOD、GSH-Px明显下降(P<0.05)。与模型组比较,β-细辛醚组及β-细辛醚+ML385组细胞凋亡率、LDH、ROS、MDA、NF-κB P56、IL-1β和IL-18明显下降,Nrf2、NQO-1、HO-1、SOD、GSH-Px明显升高(P<0.05),ML385组上述指标则相反(P<0.05)。与ML385组比较,β-细辛醚组及β-细辛醚+ML385组的细胞存活率、Nrf2、NQO-1、HO-1、SOD、GSH-Px明显下降,Nrf2、NQO-1、HO-1、SOD、GSH-Px明显升高(P<0.05)。结论 β-细辛醚可能通过激活Nrf2/HO-1通路减轻氧糖剥夺/复糖复氧诱导的星形胶质细胞氧化应激及炎症损伤来起到保护作用。
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单位神经内科; 荆门市第一人民医院; 湖北民族大学