摘要

目的探讨黄芪甲苷(AS-IV)对高糖受损人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)、CXC趋化生长因子受体4(CXCR4)的影响, 为进一步研究AS-IV通过内皮细胞调节SDF-1α/CXCR4轴改善血管新生奠定基础。方法从足月健康新生儿脐静脉中分离、培养出HUVECs, 采用血管性假性血友病因子(vWF)联合4, 6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)核染鉴定, 将获得的HUVECs用含30 mmol/L葡萄糖的EGM-2培养基培养120 h得到高糖受损HUVECs。用不同浓度梯度(25、50、100、200、400 mg/L)AS-IV干预72 h, 经酶联免疫吸附法(ELISA)检测SDF-1α和CXCR4含量, 以确定AS-IV的最佳作用浓度。用最佳浓度AS-IV干预受损HUVECs, 分别于6、12、24、48、72 h收集细胞上清液, 经ELISA法检测SDF-1α和CXCR4含量, 以确定AS-IV的最佳作用时间。将高糖受损HUVECs随机分为实验组和对照组, 同时设置空白组。实验组用最佳浓度AS-IV和最佳时间干预, 对照组和空白组用等容量PBS液处理, 用ELISA法检测各组SDF-1α和CXCR4含量。结果胞膜结合vWF因子呈绿色荧光, 细胞核DAPI核染后呈蓝色, 融合图像显示膜染绿色荧光, 核染蓝色荧光, 即为HUVECs。100 mg/L的AS-IV作用24 h时, 高糖受损HUVECs表达SDF-1α的量达最佳(1 642.87 pg/ml);50 mg/L的AS-IV作用48 h时, 高糖受损HUVECs表达CXCR4的量达最佳(8.44 ng/ml)。与对照组相比, 实验组SDF-1α和CXCR4含量明显增多, 差异有统计学意义(P<0.05);与空白组相比, 实验组SDF-1α和CXCR4含量略少, 差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AS-IV能促进高糖受损HUVECs表达SDF-1α和CXCR4, 使其恢复正常生理水平, 以发挥修复损伤血管和血管新生作用。