健脾清热活血方介导Wnt/β-catenin通路对人结肠SW480细胞的影响

作者：张保静; 张涛; 陈远能; 王小平; 潘怀耿

来源：世界华人消化杂志, 2013, 21(09): 745-753.

• 健脾清热活血中药
• β-catenin
• T细胞因子4
• C-myc
• CyclinD1
• Wnt/β-catenin
• 凋亡

目的:观察人结肠癌细胞SW480增殖、凋亡及β-catenin、T细胞因子4(Tcell factor4,TCF-4)、C-myc、CyclinD1表达变化,探讨健脾清热活血方防治结肠癌的可能机制.方法:将SW480细胞分为空白组、治疗组、对照组;采用血清药理学方法,空白组给予胎牛血清;治疗组分别给予等比稀释不同浓度含药血清;对照组给予美沙拉嗪含药血清干预体外培养的结肠癌细胞SW480(24h),应用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率、细胞周期,免疫荧光染色分析细胞β-catenin蛋白表达,Western blot及荧光定量PCR检测β-catenin、TCF-4、C-myc、CyclinD1蛋白及mRNA表达.结果:与空白组比较,治疗组SW480细胞存活率明显下降(P<0.05),稀释浓度为5%、10%、15%、20%、30%的不同剂量组细胞生长抑制率分别为28.00%、44.58%、65.86%、57.86%、49.89%,但与药物浓度没有剂量依赖性(P>0.05);与对照组比较,治疗组S期细胞增多、G1期细胞减少,且与药物浓度有剂量依赖性(P<0.05);空白组β-catenin表达以核内表达为主,治疗组β-catenin胞质/核异位表达下降(P<0.05),以胞膜表达为主;与空白组比较,治疗组可明显下调β-catenin、TCF-4、C-myc、CyclinD1蛋白及mRNA表达并促进细胞凋亡(P<0.01),以中剂量更为明显.结论:健脾清热活血方可能通过介导Wnt/β-catenin通路,干预SW480细胞G1期,诱导细胞凋亡,发挥防治结肠癌的效应.

• 单位
  广州中医药大学; 江西中医药高等专科学校; 广西中医药大学附属瑞康医院