摘要
运用UPLC-Q-TOF-MS、网络药理学和实验验证探讨穴位贴敷(acupoint sticking therapy, AST)干预支气管哮喘(bronchial asthma, BA)的作用机制。TCMSP数据库中检索白芥子、延胡索、甘遂、细辛和生姜的化学成分作为自建库,采用UPLC-Q-TOF-MS解析AST中的活性成分,在TCMSP和SwissTargetPrediction中筛选靶点;在GeneCards中收集BA靶点,运用Venny 2.1.0平台,对活性成分靶点与BA靶点取交集获得潜在靶点;将潜在靶点导入STRING和DAVID中进行PPI、GO和KEGG分析;建立屋尘螨(house dust mite, HDM)诱导的哮喘小鼠,通过肺功能、免疫印迹法(Western blot)和流式细胞术(flow cytometry)等研究AST对哮喘小鼠的作用机制。结果显示,UPLC-Q-TOF-MS得到54个活性成分,交集得到162个潜在靶点,选取前53个作为关键靶点。PPI分析、GO和KEGG分析发现,AST可能通过清风藤碱、芥子酸、二氢辣椒素、6-姜酚等活性成分,作用于SRC、PIK3CA等靶点,调节PI3K-AKT、ErbB、趋化因子、sphingolipid等信号通路以干预BA病理机制。AST能改善哮喘小鼠肺功能,下调肺组织中PI3K和p-AKT蛋白表达,增强PETN蛋白表达以及降低肺组织中Ⅱ型固有免疫细胞(typeⅡinnate lymphoid cells, ILC2s)水平。综上可得,AST可能主要通过下调PI3K-AKT通路,抑制ILC2s,从而减轻哮喘气道炎症、降低气道高反应等。
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单位南京中医药大学; 江苏省中医药研究院; 江苏省中医院