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摘要
目的 通过建立抑郁症肾阳虚证模型大鼠研究“温肾通督”针法的温肾调神功效，揭示“温肾通督”针法温阳解郁的作用机制。方法 将大鼠任意分为正常组、模型组、温针组、抑制剂组、温针+抑制剂组（温抑组），每组各20只。除正常组外，其余各组均采用氢化可的松激素注射（肌肉注射，25mg/kg）结合慢性不可预见性温和刺激进行造模。温针组和温抑组采用针刺和艾灸2种方式进行干预；温抑组和抑制剂组在取材前24h灌胃给药ESI-09[10mg/kg，环磷酸腺苷（cAMP）-RAF1信号通路抑制剂]。造模及干预前后，观察大鼠一般情况，采用强迫游泳实验、水迷宫实验观察大鼠行为学变化。ELISA检测脑源性神经营养因子（BDNF）、5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）及去甲肾上腺素（NE）含量。Westernblotting检测大鼠海马cAMP-RAF1信号通路cAMP、RAS相关蛋白1（RAP1）和RAF1的蛋白表达。结果 造模后，与正常组比较，模型组和抑制剂组大鼠表现为食量减少、懒动嗜睡、皮毛易脱落缺少光泽、大便稀溏等；温针组和温抑组的上述症状有所改善。干预后，模型组、温针组、抑制剂组和温抑组的体重均降低（P＜0.01），模型组、温针组、抑制剂组肛温均降低（P＜0.01）。与模型组相比，抑制剂组体重、肛温降低（P＜0.05，P＜0.01），温针组、温抑组体重、肛温升高（P＜0.05，P＜0.01）。与温针组相比，抑制剂组、温抑组体重均降低（P＜0.01），抑制剂组肛温降低（P＜0.01），温抑组肛温差异无统计学意义。干预后，与正常组比较，模型组、抑制剂组和温抑组的强迫游泳不动时间均延长（P＜0.01），温针组强迫游泳不动时间差异无统计学意义。与模型组相比，抑制剂组强迫游泳不动时间延长（P＜0.01），温针组、温抑组强迫游泳不动时间均缩短（P＜0.05，P＜0.01）。与温针组相比，抑制剂组、温抑组强迫游泳不动时间均延长（P＜0.01）。干预后，与正常组比较，模型组、温针组、抑制剂组和温抑组平台潜伏期、平台区域穿梭次数、平台象限时间占比均降低（P＜0.01）。与模型组相比，抑制剂组平台潜伏期、平台区域穿梭次数、平台象限时间占比均降低（P＜0.01），温针组、温抑组平台潜伏期、平台区域穿梭次数、平台象限时间占比均升高（P＜0.01）。与温针组相比，抑制剂组平台潜伏期、平台区域穿梭次数、平台象限时间占比均降低（P＜0.01），温抑组平台区域穿梭次数、平台象限时间占比增加（P＜0.05）。模型组大鼠BDNF、5-HT、DA、NE含量及海马cAMP、RAP1、RAF1蛋白表达均低于正常组（P＜0.05，P＜0.01），温针组大鼠BDNF、5-HT、DA、NE含量及海马cAMP、RAP1、RAF1蛋白表达高于模型组（P＜0.05，P＜0.01）。结论 “温肾通督”针法可能通过调控cAMP-RAF1信号通路，使海马功能得以恢复，从而改善大鼠抑郁样行为。
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