磷酸钙晶体通过BMP-2/Smad信号通路促进血管钙化

作者：刘曜蓉; 严豪; 李振元; 宫丽; 杨晓晓; 曹励欧; 倪兆慧; 钱家麒; 方炜^*

来源：中华肾脏病杂志, 2018, 34(08): 608-615.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2018.08.008

• 肾功能不全,慢性
• 钙质沉着症
• 磷酸钙类
• 肌细胞,平滑肌

目的探讨高磷诱导的磷酸钙晶体是否通过BMP-2/Smad信号通路激活人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)成骨转分化。方法高磷培养基在37℃孵育3d,超速离心法分离磷酸钙晶体和上清液,扫描电镜和能量色散X射线光谱仪分析晶体理化特征。体外培养HASMCs,分为高磷组、对照组、晶体组和上清液组。茜素红染色和邻甲酚酞络合酮法测钙化结节和细胞内钙含量。Western印迹法测骨形态发生蛋白2(BMP-2)、转录因子RUNX2、骨桥蛋白(OPN)、磷酸Smad1/5/9 (p-Smad1/5/9)蛋白表达。HASMCs分别进行BMP-2和Smad1基因敲减,Western印迹法测蛋白表达。结果高磷培养基诱导磷酸钙晶体形成。与对照组相比,磷酸钙晶体促进HASMCs钙化结节形成,增加细胞内钙含量,上调BMP-2、RUNX2和OPN蛋白表达(均P <0.05)。磷酸钙晶体刺激HASMCs 30 min后,p-Smad1/5/9蛋白水平达到峰值(P <0.05)。敲减BMP-2基因后,磷酸钙晶体刺激HASMCs后p-Smad1蛋白表达受抑,RUNX2和OPN蛋白表达降低(均P<0.05)。敲减Smad1基因后,磷酸钙晶体刺激HASMCs后RUNX2和OPN蛋白表达降低(均P<0.05)。结论高磷诱导的磷酸钙晶体通过BMP-2/Smad信号通路促进HASMCs成骨转分化。

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院