基于液质联用技术的溶菌酶一级结构分析研究

作者：尹红锐; 张颖; 方欣欣; 陈钢; 邵泓; 郑璐侠^*

来源：药物分析杂志, 2023, 43(01): 12-19.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2023.01.02

• 溶菌酶
• 一级结构
• 超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱
• 相对分子质量
• 氨基酸序列
• 二硫键

目的:使用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱法(UPLC-Q TOF MS法)对国内外3家企业溶菌酶的一级结构进行分析研究。方法:采用BEH300 C4(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱和BEH300 C18(150 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱，以0.1%甲酸/水溶液为流动相A,0.1%甲酸/乙腈溶液为流动相B,梯度洗脱，流速0.2 mL·min-1;采用Q TOF MS的电喷雾正离子模式，相对分子质量测定时采用MS模式进行扫描，氨基酸序列和二硫键连接方式测定时采用MSE模式进行扫描。结果:3种来源溶菌酶相对分子质量与理论值一致；肽图结果显示各样品的氨基酸序列均与理论一致；二硫键连接方式均为Cys6-Cys127、Cys30-Cys115、Cys64-Cys80、Cys76-Cys94。结论:UPLC-Q TOF MS法可用于溶菌酶一级结构的分析。