丙型肝炎病毒河北株E2蛋白胞外核心区的真核表达及应用

作者：叶传涛; 边培育; 翁代慧; 张会; 杨敬; 张颖; 雷迎峰; 贾战生

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2016, 32(06): 746-749.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.007780

• 丙型肝炎病毒(HCV)
• E2蛋白胞外核心区(E2c)蛋白
• 真核表达
• 基于雪花莲凝集素的改良ELISA

目的真核细胞表达丙型肝炎病毒(HCV)河北株E2蛋白胞外核心区(E2c)并利用E2c蛋白检测HCV患者血清中特异性抗E2蛋白抗体水平。方法以HCV1b型(河北株)基因序列为基础,设计HCV1b E2c基因序列并通过基因拼接的方法合成;将含有组织型纤溶酶原激活物(t PA)信号肽的E2c扩增产物克隆入p CI-neo真核表达载体,获得p CI-tpa-1b E2c载体;将p CI-tpa-1b E2c真核表达载体转染HEK293T细胞,收集细胞上清后进行浓缩及纯化,Western blot法鉴定蛋白特异性;以获得E2c蛋白为抗原,建立基于雪花莲凝集素(GNA)的改良ELISA检测HCV患者血清特异性抗E2c抗体水平。结果成功利用真核表达系统表达获得E2c蛋白,建立了GNA改良ELISA检测HCV患者血清中抗E2蛋白抗体的方法。结论成功在HEK293T细胞表达HCV-1b E2c蛋白并进行了临床应用。

• 单位
  第四军医大学