绵羊痘病毒和山羊痘病毒实时荧光重组酶聚合酶检测方法的建立

作者：杨俊; 聂福平; 周庆; 王昱; 史梅梅; 李贤良; 王国民; 吴蕊; 张欢; 陈冉越; 唐昌杰; 刘生峰; 李应国^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(05): 544-550.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0066

• 绵羊痘病毒
• 山羊痘病毒
• 重组酶聚合酶扩增

为建立一种快速、敏感鉴别诊断绵羊痘病毒(SPPV)和山羊痘病毒(G TPV)的方法,本研究根据SPPV和GTPV基因组保守区,分别设计特异性引物和探针,建立了SPPV和GTPV实时荧光RPA (real-time fluorescent recombinase polymerase amplification)检测方法。结果显示,该方法仅对SPPV和GTPV的靶基因扩增呈阳性,而对牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、传染性脓疱病毒(O RFV)、蓝舌病病毒(BTV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、水疱性口炎病毒(VSV)、A型口蹄疫病毒(FM DV type A)、O型口蹄疫病毒(FMDV type O)、亚洲1型口蹄疫病毒(FMDV Asia 1)等相关病毒检测结果均为阴性,特异性良好;对SPPV和GTPV检测的灵敏度分别为4.72×102copies/μL和4.35×102 copies/μL;利用该方法对临床样品进行检测,与OIE推荐的普通PCR检测结果符合率为100%。结果表明,建立的SPPV和GTPV实时荧光RPA方法灵敏、快速、特异性强,为SPPV和GTPV感染的早期诊断提供了技术支持,适用于SPPV和GTPV的检疫、疫情监测及流行病学调查,对疫情暴发后相应控制方案的制定具有重要意义。

• 单位
  重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心