TDO2基因敲除小鼠模型的建立和初步表型研究

作者：李素素; 常艳^*; 魏伟^*

来源：中国药理学通报, 2021, 37(05): 730-734.

DOI：10.3969/j.issn.1001-1978.2021.05.024

• TDO2
• 基因敲除
• 表型
• 小鼠
• 繁育
• CRISPR/Cas9

目的构建TDO2基因敲除的C57BL/6小鼠,初步研究其表型。方法根据CRISPR/Cas9技术原理,设计并体外转录sgRNA,用显微注射法将Cas9、sgRNA同时注射到小鼠的受精卵。经胚胎移植,获得可能出现多种基因型并存的F0代小鼠。利用PCR法进行基因型判定,获得阳性F0代小鼠。由阳性F0代小鼠与野生型小鼠回交得到F1代杂合子小鼠。阳性F1代杂合子小鼠之间配繁,得到F2代纯合子小鼠。观察和分析纯合子小鼠的生长特性,繁殖能力和子代存活率。Western blot验证TDO2基因敲除纯合子小鼠肝脏组织中TDO2的蛋白表达。结果成功繁育和鉴定出TDO2基因敲除小鼠,PCR法成功鉴别了子代鼠的基因型; Western blot结果表明,TDO2基因敲除小鼠的肝脏组织中TDO2蛋白不表达。TDO2基因敲除小鼠饮食、体质量等未发现异常改变。结论成功建立TDO2基因敲除小鼠,为研究TDO2基因的生物学功能和在疾病中的调控作用提供实验手段。

• 单位
  安徽医科大学