膜联蛋白A5绿色荧光蛋白重组质粒的构建及其在宫颈癌细胞系Hela细胞中的表达

作者：李欣; 高福禄; 王芳; 何颖; 孙树汉

来源：解剖学杂志, 2006, (04): 443-445.

• 膜联蛋白A5
• 绿色荧光蛋白
• 重组质粒
• Hela细胞

目的：构建在哺乳动物细胞中表达的膜联蛋白A5(anxA5)的重组质粒,并在真核细胞中表达。方法：用PCR方法从pJLA503-anxA5质粒中扩增anx A5的基因序列,引入酶切位点XhoⅠ和Bam HⅠ。将真核表达质粒pEGFP-N1和anxA5的PCR产物经双酶切后用T4连接酶连接,并经鉴定序列正确后,用磷酸钙共沉淀法稳定转染Hela细胞,荧光显微镜下观察；免疫细胞化学染色观察anxA5在Hela细胞的表达。结果：重组质粒鉴定正确,稳定转染Hela细胞,在荧光显微镜下可见绿色荧光,免疫细胞化学染色可见anxA5表达。结论：成功构建了pEGFP-anxA5重组质粒,并能在宫颈癌细胞系Hela细胞中表达,为研究anxA5的功能及其在细胞系中的作用奠定了基础。

• 单位
  承德医学院; 河北医科大学; 中国人民解放军第二军医大学