梅迪-维斯纳病毒Gag蛋白原核表达与间接ELISA检测方法的建立

作者:张彦红; 肖盛中; 李岩; 杨艳; 姜蒙蒙; 蒙亚琦; 盛金良*
来源:动物医学进展, 2020, 41(05): 25-28.
DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2020.05.005

摘要

Gag蛋白是梅迪-维斯纳病毒(MVV)的主要结构蛋白,也是诊断梅迪-维斯纳病的主要靶蛋白。为建立MVV抗体间接ELISA检测方法,利用大肠埃希菌将含Gag基因的质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞中,最终获得高效表达的Gag蛋白,进一步进行ELISA条件的优化。所建立的方法敏感性试验显示在阳性血清1∶3 200倍稀释时仍能检出,其组内与组间变异系数均低于10%,具有良好的重复性。对162份临床血清样品进行检测,同时用购自法国IDVET公司的间接ELISA进行比较,符合率达到89.65%。应用该方法对新疆地区1个种羊场和1个育肥羊场的294份羊血清样品进行了检测,结果显示MVV抗体阳性率分别为10.5%和1.77%,表明种羊场中MVV感染率高于育肥羊场,该研究结果可为MVV抗体检测试剂盒的开发提供支持。