灯盏细辛通过VDAC1/ROS/NLRP3通路减轻H2O2诱导的心肌细胞损伤

作者：田源; 肖雯; 侯常苗; 温慧莉; 游三丽; 袁李礼^*

来源：中国临床药理学杂志, 2023, 39(20): 2927-2931.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2023.20.009

• 灯盏细辛
• 电压依赖性阴离子通道1
• 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3
• 活性氧
• 焦亡

目的 探讨灯盏细辛(EB)对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法 建立体外H2O2诱导的心肌细胞氧化应激损伤模型。将体外培养的HL-1小鼠心肌细胞分为空白组(常规培养)、对照组(4 mg·L-1 EB 1 h)、模型组(800μmol·L-1 H2O2 1 h)、实验组(4 mg·L-1 EB+800μmol·L-1 H2O2 1 h)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力；用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞损伤情况；用流式细胞术检测活性氧(ROS)含量；用蛋白质印迹法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)和电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)蛋白表达水平；用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)含量；用钙黄绿素乙酰甲酯(Calcein AM)检测线粒体通透性转换孔(mPTP)的开放程度。结果 空白组、对照组、模型组和实验组的细胞活力分别为(93.58±7.33)%、(95.18±4.24)%、(52.20±6.98)%和(74.80±5.33)%;LDH释放量分别为(44.18±6.36)、(46.16±5.01)、(689.60±124.00)和(365.60±87.79)U·L-1;ROS释放量分别为0.97±0.10、0.97±0.05、5.18±0.21和3.08±0.41;NLRP3蛋白表达水平分别为0.98±0.06、0.99±0.01、1.98±0.19和1.60±0.17;GSDMD蛋白表达水平分别为1.00±0.07、1.00±0.05、1.97±0.09和1.46±0.10;IL-1β释放量分别为(25.39±5.35)、(25.02±2.37)、(214.8±35.90)和(117.50±23.66)pg·mL-1;VDAC1蛋白表达水平分别为1.00±0.04、1.01±0.05、3.18±0.15和1.80±0.18;30 min的mPTP孔开放水平分别为1.22±0.02、1.22±0.01、1.14±0.02、1.17±0.01。模型组上述指标与空白组比较，差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);实验组上述指标与模型组比较，差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 灯盏细辛减轻H2O2诱导的HL-1心肌细胞损伤，其机制可能与通过VDAC1调节ROS/NLRP3通路有关。

• 单位
  湖南省脑科医院; 湖南中医药大学; 生命科学学院; 湖南师范大学