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摘要
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)乙基化衍生物Y6在逆转耐阿霉素(DOX)人肝癌细胞耐药过程中对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)途径的影响。方法 将对数生长期的耐DOX人肝癌细胞BEL-7404/DOX随机分为空白对照组、DOX组、DOX+维拉帕米(VER)组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组和DOX+高剂量Y6组，空白对照组不加任何药物，DOX组加入终浓度为10μmol·L-1的DOX,DOX+VER组加入终浓度为10μmol·L-1的DOX和10μmol·L-1的VER,DOX+EGCG组加入终浓度为10μmol·L-1的DOX和10μmol·L-1的EGCG,DOX+低剂量Y6组加入终浓度为10μmol·L-1的DOX和10μmol·L-1的Y6,DOX+高剂量Y6组加入终浓度为10μmol·L-1的DOX和15μmol·L-1的Y6,各组细胞加药完毕后，置于37℃、含体积分数5%CO2的恒温培养箱中培养48 h,采用Western blot法检测各组细胞中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、ERK1/2、磷酸化JNK(p-JNK)、JNK、磷酸化p38(p-p38)、p38的蛋白相对表达量，并计算p-ERK1/2与ERK1/2蛋白相对表达量比值(p-ERK1/2/ERK1/2)、p-JNK与JNK蛋白相对表达量比值(p-JNK/JNK)、p-p38与p38蛋白相对表达量比值(p-p38/p38)。结果 DOX组耐DOX人肝癌细胞中的p-ERK1/2/ERK1/2与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组和DOX+高剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-ERK1/2/ERK1/2均显著高于空白对照组和DOX组(P<0.05);DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组和DOX+高剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-ERK1/2/ERK1/2比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较，DOX组、DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组和DOX+高剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK均显著增高(P<0.05);与DOX组比较，DOX+VER组、DOX+高剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK均显著增高(P<0.05);DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK与DOX组比较差异均无统计学意义(P>0.05);与DOX+VER组比较，DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK均显著降低(P<0.05);与DOX+低剂量Y6组比较，DOX+高剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-JNK/JNK显著增高(P<0.05)。与空白对照组比较，DOX组、DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组和DOX+高剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-p38/p38均显著增高(P<0.05);与DOX组比较，DOX+VER组、DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组和DOX+高剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-p38/p38均显著增高(P<0.05);与DOX+VER组比较，DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-p38/p38均显著降低(P<0.05);DOX+EGCG组、DOX+低剂量Y6组、DOX+高剂量Y6组耐DOX人肝癌细胞中p-p38/p38比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Y6通过上调ERK l/2、JNK及p38蛋白的磷酸化水平激活3条平行的MAPK信号通路逆转BEL-7404/DOX细胞耐药。
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