荧光定量聚合酶链反应分型检测单纯疱疹病毒方法的评价与应用

作者：刘军连; 司少艳; 常国辉; 杜海平; 徐冰心; 吕世超; 敬华; 易勇

来源：实用预防医学, 2014, 21(08): 897-899.

• 单纯疱疹病毒
• 荧光定量聚合酶链反应
• 检测
• 分型

目的荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)用于单纯疱疹病毒(HSV)分型检测的方法学评价及其初步应用。方法以HSV-1 DNA多聚酶基因和HSV-2糖蛋白D基因为靶基因区,设计合成正向引物、反向引物和探针,采用FQ-PCR分别检测HSV-1和HSV-2标准株,对FQ-PCR进行方法学评价,并与病毒分离培养法相比较。结果建立的FQ-PCR对HSV检测和分型具有特异性;线性范围好(标准品的浓度在5×1025×108copies/ml,r=0.998);灵敏度达到5×102 copies/ml;重复性较好,批内CV值为2.3%,批间CV值为4.8%。对120份生殖器棉拭标本用FQ-PCR和分离培养法进行分型检测,FQ-PCR的阳性率为25.8%,高于分离培养法的阳性率20.0%(P<0.05)。结论 FQPCR方法具有快速、特异性好、敏感性高的优点,且分型准确,可用于HSV感染的早期诊断和分型。

• 单位
  中国人民解放军军事医学科学院; 中国人民解放军第306医院; 病原微生物生物安全国家重点实验室